川芎嗪对依托泊苷诱导小细胞肺癌细胞凋亡增敏作用的评判
四甲基吡嗪;,依托泊苷;,脱噬作用;,流式细胞术,,四甲基吡嗪;,依托泊苷;,脱噬作用;,流式细胞术,1材料与方法,2结果,3讨论,参考文献
摘要： 目的：观察低浓度(10 μg/ml)的中药钙拮抗剂川芎提取物川芎嗪(tetramethylpyrazine,TMP)与化疗药物依托泊苷(etoposide,VP16)合用对人小细胞肺癌(small cell lung cancer,SCLC)细胞的影响。方法： 用MTT法观察药物对体外培养的人小细胞肺癌H446细胞存活率的影响;用吖啶橙/溴乙啶双荧光染色法检测凋亡细胞，采用流式细胞术分析药物对H446细胞周期的影响。结果： TMP和VP16合用与单用VP16相比细胞存活率明显下降,VP16的浓度在0.1、1、10、100 μg/ml时,细胞存活率分别为(93.85±2.51)%、(91.90±2.10)%、(66.64±3.73)%和(8.21±1.84)%。VP16与低浓度的TMP联用后,上述浓度细胞存活率分别降为(90.80±1.20)%、(78.96±1.94)%、(51.48±2.52)%和(2.56±1.44)%,其合并指数为0.85,增效倍数为4.32。双荧光染色法证实TMP可增强VP16的凋亡诱导作用;细胞周期分析表明低浓度TMP对细胞周期无明显影响,VP16半数抑制浓度使细胞生长停滞在S期,抑制细胞有丝分裂及DNA合成,两者合用主要表现为VP16的作用。结论： 低浓度的TMP与VP16合用可增加对小细胞肺癌细胞的诱导凋亡作用。关键词： 四甲基吡嗪; 依托泊苷; 脱噬作用; 流式细胞术
川芎嗪是中药川芎的有效成分之一，又称四甲基吡嗪，属酰胺类生物碱，该制剂主要应用于心脑血管疾病等[1]。近年来文献报道TMP与维拉帕米同样具有钙通道阻滞活性，是一种中药钙通道阻滞剂[2]，钙拮抗剂的化疗增敏效应已被广泛认同[3]。但由于这些药物增敏所需剂量过大，严重时可导致心脏毒副作用等原因，难以在临床推广应用[4] 。而TMP临床应用多年，作用缓和，毒副作用较少。本研究应用MTT法、双荧光染色法、流式细胞术观察低浓度的TMP与临床常用的化疗药物依托泊苷合用对人小细胞肺癌H446细胞的影响，旨在为小细胞肺癌临床治疗提供新的经验。
1 材料与方法
11 材料
人小细胞肺癌H446细胞株购于中国协和医科大学细胞库；TMP购自北京第四制药厂；VP16购自北京双鹤现代医药技术有限公司；RPMI1640培养基购自美国Gibco公司；吖啶橙、溴乙啶、MTT、RNA酶购自华美生物试剂公司。
12 方法
121 细胞培养 将H446细胞用RPMI1640培养基培养 ......
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